流式抗體搭配熒光素原則

       流式抗體搭配流式熒光素主要有2個原則：*，每個通道只能選擇1種熒光素；第二，各個通道之間的熒光素可以隨意搭配，因此需要注意：
       1、流式抗體每個通道只能選擇1種熒光素。以Calibur為例說明，Calibur的FL1通道選擇了Alexa Fluro488就不能選FITC ，或者選擇了FITC就不能選擇AlexaFluro488。Calibur的FL3通道盡管能檢測PE-Texas Red, PE-Cy5, PerCP, PerCP-Cy5.5, PE-Cy7五個熒光素，但是我們搭配的時候只能選擇其中1個。
       2、各個通道之間的熒光素可以隨意搭配：如果客戶的流式細胞儀能做4個通道，在第1個原則之下，那么每個通道隨便選出1個熒光素就可以組合成4個顏色。以2跟激光的Calibur為例，Calibur各個熒光素之間可以搭配出16種組合。比如常用的搭配是F I T C（ F L 1 ）＋P E（F L 2）＋PerCP（FL3）+APC（FL4）, 這個搭配組合可以更改成Alex Fluro（FL1）＋PE（FL2）＋PerCP（FL3）+APC（FL4）, 或者FITC（FL1）＋PE（FL2）＋PerCP（FL3）+Alex Fluro（FL4），或者FITC（FL1）＋PE（FL2）＋PE-Cy5（FL3）+APC（FL4）等等。總之，在第1原則之下，我們可以隨意搭配和組合各個熒光素。但是需要注意的是，APC和PE-Cy5一起使用的話，上流式以后，容易導致補償過度。

所以說，以上也是流式抗體熒光素搭配的注意事項！